又称作NBT光还原法,检测原理是在有氧化物质存在下核黄素被光还原,在有氧条件下,被还原的核黄素极易再氧化产生超氧阴离子自由基(O2.-),O2.-可将氮蓝四唑NBT还原为蓝色的甲腙,后者在560nm处有强吸收,而SOD可清除超氧阴离子(O2.-),从而抑制了甲腙的形成。于是光还原反应后,反应液蓝色愈深,说明SOD活性愈低,反之酶活性愈高,据此通过酶标仪比色分析就可以计算出样品中总超氧化物岐化酶活性水平。本方法是利用SOD抑制NBT在光照下的还原作用来确定酶活性大小,可用于检测植物、组织、细胞、血清或其它样品中SOD活性。